| Titre : | Isolement, Purification, Identification de microorganisme symbiotique de Médicago minima en vue de la production d’engrais biologique |
| Auteurs : | KOURAT:Sarah, Auteur ; HOCINE:Ibtissem Chahrazed, Auteur ; fares.soria, Directeur de thèse |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | Dr. Moulay Tahar Université Saida, Faculté des Sciences Naturelles et de la Vie, 2014/2015 |
| Format : | 43 p / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | Medicago minima ; Rhizobium ; zone semi-aride ; nodulation ; les éléments nutritifs ; engrais biologiques |
| Résumé : |
En méditerranée, exactement en Algérie le rendement des cultures est faible, sont souvent
expliqués par les conditions pluviométriques défavorables et les éléments nutritifs sont pauvres. A cause des conditions précédents en allons crées des recherches scientifiques qui préconise des stratégies basés sur l’utilisation des engrais biologiques. Dans notre recherche nous visons à soutenons des souches de Rhizobia des zones semi-aride et la constitution d’un souche de bactéries provenant de la luzerne naine à Saida. Au commencement, de notre étude les 6 souches ont été écrasées et isolées par méthode des striés les nodules des racines de Medicago minimade régionMaamora dans sud-est de Saida. Et apartir de plusieurs répétition de purification des isolats. Les bactéries sont caractérisés par examens macroscopiques et microscopiquesdonne une explication comparable à celle des Rhizobiums. Nous avons contrôlé la croissance bactérienne de chaque souche à fin déterminé le temps nécessaire pour atteindre la phase exponentielle. Nous avons testé les 6 souches à différents températures pour confirmer quelles sont les températuresidéals et les plus résistible. En fin, explique sur le test nodulation à partir les 6 souches de Rhizobiums et Medicago minima les résultats obtenus que les souches sélectionner ne forment pas les nodules |
| Note de contenu : |
Introduction…………………………………………………………01
I .Revue bibliographique I .Les symbioses fixatrices d’azote………………………………………………...03 I.1 Les symbioses Rhizobiums -légumineuses ………………………………....03 I.2 Les partenaires de la symbiose Rhizobienne ……………………………….04 I.2.1 partenaire végétal ……………………………………………………..04 I.2.1.1 Généralité sur légumineuses …………………………………04 I .2.1.2 Données sur Medicago minima ……………………………..04 I .2.1.2.1Morphologie de Medicago minima …………………..04 I .2.1.2.2 Position systématique ………………………………..05 I.2.2 partenaire bactérien …………………………………………………..06 I.2.2.1 Généralité sur les Rhizobiums …………………………………06 I.2.2.2 Classification actuelle des Rhizobiums ………………………….06 I.3 Etablissement de la symbiose ………………………………………………..08 I.3.1 La formation des nodules ……………………………………………...09 I.3.1.1 Stade de Pré-infection …………………………………………..09 I.3.1.2 Stade de l’infection …………………………………………......09 I.3.1.3 Développement du nodule ………………………………………10 I.4 Application biotechnologique des Rhizobiums …………………………………11 I.4.1 Production d’inoculum Rhizobiums ……………………………………...11 I.4.2 Les différents types d’inoculum ………………………………………….12 I.4.3 Condition d’inoculation …………………………………………………..12 II. Matériels et Méthodes ………………………………………………….14 II.1 Matériels biologique …………………………………………………………….14 II.1.1. Sol …………………………………………………………………………14 II.1.2 Matériel végétal …………………………………………………….............14II.1.2.1 Medicago Minima………………………………………………….14 II.1.2.2 Provenance des graines ……………………………………………..15 II.2 Méthodes ………………………………………………………………………15 II.2.1 Choix du site de prélèvement ……………………………………………...15 II.2.2 Analyse de sol ……………………………………………………………...16 Détermination de l’humidité ………………………………………………….16 Détermination de la conductivité électrique …………………………………..17 Détermination du potentielle d'hydrogène (pH) …………………………….....17 II.2.3 Prélèvement des plantes in-nature …………………………………………....18 II.3 Isolement des bactéries à partir des nodules récoltées in-nature………………….18 II.3.1 Collecte des nodules ………………………………………………………….18 II.3.2 La conservation des nodules par déshydratation ……………………………..19 II.3.2.1 Isolement et purification des isolats bactériens ………………………….19 II.3.2.1.1 Stérilisation des nodules ………………………………………….19 II.3.2.1.2 Isolement selon la méthode du nodule écrasé ……………………..20 II.3.2.1.3 Purification des isolats …………………………………………......20 Vérification de la pureté des souches ………………………………………………20 Coloration de Gram …………………………………………………………………21 II.3.2.1.4 Conservation des souches ……………………………………….....22 II.3.3 Examen de la mobilité des isolats …………………………………………...23 II.3.4 Etude de la croissance bactérienne …………………………………………24 II.3.5 Effet de la température sur la croissance bactérienne ………………………24 II.4 Test de nodulation ………………………………………………………………24 II.4.1 Stérilisation, germination et mise en culture des plantules de Medicago minima ………………………………………………………………………………………24 II.4.2 Culture des plantes…………………………………………………………25 II.4.3 Inoculation …………………………………………………………………25II.4.4 Estimation de la croissance des plantes in-vitro et Observation du phénotype des plantes inoculées ………………………………………………………………………26 III. Résultats et Discussion …………………………………………………...28 III.1 présentation de la zone d’étude …………………………………………………..28 III.1.1 Caractéristiques de la zone d’étude ………………………………………..28 III.1.2 Analyse de sol …………………………………………………………….29 III.2 Isolement des rhizobiums ……………………………………………………….30 III.2.1 Constitution d’une collection de souches ……………………………….30 III.2.2 Etude de la diversité des isolats ………………………………………….31 III.2.2.1 Caractéristiques morphologiques ………………………………31 III.2.2.1.1 Caractéristiques macroscopiques ……………………...31 III.2.2.1.2 Caractéristiques microscopiques ……………………….32 III.2.2.1.3 Test de mobilité des isolats …………………………….33 III.2.2.2 Conservation des souches ………………………………………34 III.2.2.3 Croissance bactérienne ………………………………………….35 Aspect des cultures sur YEM liquide ………………………………………………35 Cinétique de croissance …………………………………………………………….35 III.2.2.4 Effet de la température sur la croissance des isolats bactérien …37 III.3 Etude des inoculations des plantes in- vitro ……………………………………..38 III.3.1 Test de nodulation ………………………………………………………38 III.3.2 Estimation du test de nodulation in-vitro………………………………...39 III.3.2.1 Germination de graines …………………………………………39 III.3.2.2 Résultats du test de nodulation …………………………………...40 III.3.2.3 Observation du phénotype des plantes ……………………………42 IV. Conclusion……………………………………………………43 Référence bibliographique |
Exemplaires
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