| Titre : | Contribution à l’étude comparative (in vitro et in vivo) de l’effet antimicrobien, cicatrisant et synergique du miel et jus de citron |
| Auteurs : | Boubakiri Ilham, Auteur ; Djedid Fatima Zohra, Auteur ; Amamm.Abdel kader, Directeur de thèse |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | Dr. Moulay Tahar Université Saida, Faculté des Sciences Naturelles et de la Vie, 2015-2016 |
| Format : | 100 p. / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | miel ; antibactérienne ; jus de citron ; in vivo ; in vitro ; cicatrisant ; E.coli ; Staphylococcus aureus |
| Résumé : |
Le miel élaboré par les abeilles est constitué de sucre et l’eau essentiellement. Il porte
d’autres substances d’origine végétale et animale qui font de lui un produit complexe hétérogène et variable au cours du temps. Il présente de propriété cicatrisante. Beaucoup des études démontrées que le miel à un effet inhibiteur sur plusieurs bactéries pathogènes. Le but de cette étude est de démontré l’activité antibactérienne de miel et jus de citron sur les souches E.coli et Staphylococcus aureus in vivo et in vitro. In vitro démontre la concentration minimale inhibitrice et synergique (miel et jus de citron) et in vivo l’application de jus de citron et le miel sur la plaie de lapin pour tester effet antibactérien et cicatrisant. L’activé antibactérienne sur les deux souches de bactéries à été déterminée par mélange des concentrations variable à la gélose Muller Hinton qui inoculé par les espèces bactériennes. Le miel à été trouvé pour être efficace à la concentration 30% pour les deux souches testées. La concentration minimale inhibitrice de jus du citron 4% La concentration minimale inhibitrice synergique des deux variétés de miel testé vis-à-vis E.coli est de [19% (El) +1% de jus de citron] et [18% (E2) +2% de jus de citron] pour des valeurs de concentrations minimales inhibitrices obtenues avec le miel seul est 30% pour E1 et E2. Pour Staphylococcus aureus la concentration minimale synergique se situe aussi entre [19% (El) +1% de jus de citron] et [18% (E2) +2% de jus de citron] pour des concentrations minimales inhibitrices de 30% (El et E2). Cette étude justifie l’utilisation du miel et jus de citron on séparément et en mélange comme une médicine alternative par la population dans le traitement de l’infection bacterien. In vivo : le jus de citron est très efficace que le miel pour le traitement des maladies infectieuses. Par contre le miel permet une cicatrisation plus rapide. |
| Note de contenu : |
Introduction ……………………………………………………………………………………………………………………………….01
Première partie : Recherches bibliographiques Chapitre I : Le miel 1.1. Définition………………………………………………………………………………03 1.2. Origine du miel ………………………………………………………………………..03 1.2.1. Origine direct…………………………………………………………………………03 1.2.2. Origine indirecte………………………………………………………………….…..04 1.2.3. Composition du miellat……………………...……………………………………….04 1.3. Formation du miel……………………………………………………………………..05 1.3.1. Fabrication du miel par les abeilles………………………………………………….05 1.3.2. Transformation chimique…………………………………………………………….05 1.4. Types de miel…………………………………………………………………………..06 1.5. Composition chimique du miel………………………………………………………..06 1.5.1. Eléments majeurs…………………………………………………………………....07 1.5.1.1. Hydrate de carbone………………………………………………………………..07 1.5.1.2. Eau…………………………………………………………………………………07 1.5.2. Eléments mineurs…………………………………………………………………….07 1.5.2.1. Les acides………………………………………………………………………….07 1.5.2.2. Les acides aminés………………...……………………………………………….07 1.5.2.3. Les enzymes…………………………………………………………………….…08 1.5.2.4. L’hydroxy methyl furfural (HMF)………………………………………………..08 1.5.2.5. Les lipides…………………………………………………………………………08Table des matières 1.5.2.6. Les sels minéraux et les vitamines………………………………………………..08 1.5.2.7. Les substances photochimiques…………………………………………………...09 1.5.2.8. Les micro-organismes……………………………………………………………..09 1.6. Caractéristiques du miel………………………………………………………………..09 1.6.1. Caractéristiques physico-chimiques ……………………………………………….09 1.6.1.1. Densité…………………………………………………………………….……….09 1.6.1.2. Viscosité……………………………………………………………………….….09 1.6.1.3. Activité de l’eau………………………………………………………..…………..10 1.6.1.4. pH…………………………………………………………………………….…....10 1.6.1.5. Abaissement du point de congélation…………………….………………………..10 1.6.1.6. Conductivité électrique……………………………………………….……………10 1.6.1.7. Indice de réfraction ………………………………………….……………………11 1.6.1.8. Hygroscopicité ………………………………………………………….……........11 1.6.2. Caractéristiques nutritionnelles…………………………………………….……….11 1.6.3. Caractéristiques organoleptiques…………………………………………………...11 1.6.3.1. Cristallisation ……………………………………………………………….…….11 1.6.3.2. Couleur……………………………………………………………………….…….12 1.6.3.3. Odeur et goût……………………………………………………………….………12 1.7. Miels toxiques………………………………………………………………….……….12 1.8. Altération…………………………………………………………………………….….13 1.8.1. Effet de vieillissement…………………………………………………………..……..13 1.8.2. Effet de fermentation………………………………………………………………....13 1.8.3. Effet de la température…………………………………………………………….....13 1.8.4. Effet de la lumière…………………………………………………………………..…13 1.9. Effet antibactérien du miel………………………………………………………….….14 1.10. Mécanismes d’action de l’effet antibactérien du miel…………………………..……14 1.10.1. Peroxyde d’hydrogène……………………………………………………………..…14 1.10.2. Pression osmotique…………………………………………………………..……….15 1.10.3. Acidité……………………………………………………………………….……….15 1.10.4. Inhibines non peroxydes………………………………………………………..….....15 Chapitre II : Les agrumes 2.1. Les agrumes…………………………………………………………….……………….16 2.1.1. Historique de la culture des agrumes……………………………………………….…16Table des matières 2.1.2. Définition……………………………………………………………………………...16 2.1.3. Systématique………………………………………………………………………….17 2.1.4. Caractéristiques des agrumes………………………………………………………..17 2.1.5. Espèces et variétés…………………………………………………………………...18 2.1.6. Importance des agrumes……………………………………………………………….23 2.1.6.1. Valeur économique…………………………………………………………………23 2.1.6.2. Valeur alimentaire………………………………………………………………….23 2.2. Citrus (Citrus limon)…………………………………………………………………….24 2.2.1. Définition ……………………………………………………………………………..24 2.2.2. Description botanique………………………………………………………………….24 2.2.3. Classification et variété…………...……………………………………………………24 2.2.4. Structure de fruits……………….……………………………………………………..25 2.2.5. Composition chimique…………………………..……………………………………..25 2.2.5.1. Les acides organiques……………………………………………………………....26 2.2.5.2.Les glucides……………………………………………………………………….26 2.2.5.3.Composés azotés…………….………………………………………………….….27 2.2.5.4.Lipides…………………………………………………….…………………….…27 2.2.5.5. Composition inorganique…………………………………..……………………….28 2.2.5.6. Les vitamines ……………………………………………………………………….28 2.2.5.7. Caroténoïdes…………………………...……………………………………………28 2.2.5.8. Limonoïdes………………………………………………………………………….29 2.2.5.9. Flavonoïdes……………………………………………………………...…………..29 2.2.6. Propriétés nutritionnelles et thérapeutiques………………………………………….29 2.2.6.1. Nutritionnelles………………………………………………………………………30 2.2.6.2. Thérapeutique …………………………………………...………………………….30 2.2.6.2.1. Propriété antibactériennes……………………………..……………………….….30 2.2.6.2.2. Propriété inflammatoire ………………………………………………………….31 2.2.6.2.3. Propriétés anti cancers ……………………………………..……………………..31 2.2.6.2.4. Autres propriétés thérapeutiques…………………………………………………..31 Chapitre III : Généralité sur les lapins 3.1. Importance du lapin…………………………….………………………………………..32 3.1.1. Place du lapin dans l'alimentation de l'homme……………..…………………………32 3.1.2. Importance socio-économique……………………………………..…………………..32Table des matières 3.1.3. Aperçu sur la biologie du lapin…………………….…………………………………..32 3.1.3.1. Taxonomie du lapin…………………………………………………………………32 3.1.3.2. Extérieur du corps et morphologie…………………………...……………………..32 3.1.3.3. Comportement alimentaire et alimentation du lapin………………………..………33 3.1.3.4. Comportement alimentaire…………………………………………………………..33 3.1.3.5. Alimentation en eau et en aliment…………………………………………..………34 3.1.3.6. Habitat………………………………………...……………………………………..35 3.1.3.7. La reproduction………………………………...……………………………………35 3.1.4. Les pathologies dominantes du lapin…………………………..……………………..36 Chapitre IV : Biologie d’E. coli et St.aureus 4.1. Biologie d'Escherichia coli…………………………….…………………………….…..38 4.1.1. Généralités………………………………………………...……………………………38 4.1.2. Classification……………………………………..…………………………………….38 4.1.3. Habitat et écologie……………………………………………….……………………..39 4.1.4. Culture………………………………………………………………………………….39 4.1.5. Morphologie…………………………………………………………………………..39 4.1.6. Besoins nutritifs………………………………………………………………………40 4.1.7. La croissance………………………………………………….………………………..40 4.1.8. Pouvoir infectieux d'E. Coli…………………………………………..………………..40 4.1.8.1. Infection intestinale………………………..………………………………………..41 4.1.8.2. Infection extra intestinale………………………….………………………………..41 4.1.8.2.1. Infection urinaire……………………… …………………………………..….….41 4.1.8.2.2. Septicémies………………………………………………………………………...42 4.1.8.2.3. Méningites………………………………………..………………………………..42 4.1.8.3. Résistance aux antibiotiques………………………………………………………...42 4.2. Biologie de Staphylococcus aureus…………..………………………………………….42 4.2.1. Généralités…………………………………………………………………………….42 4.2.2. Classification…………………………………………………………………….……..43 4.2.3. Habitat et écologie……………………………………………………………..…….…43 4.2.4. Physiologie……………………………………………………………………….…….44 4.2.4.1. Type respiratoire……………………………………………………..……..………44 4.2.4.2. Besoins nutritifs et facteurs de croissance…………………………………………..44 4.2.5. Pathologie du Staphylococcus aureus………………………..……..…………….……45 4.2.5.1. Les infections digestives à Staphylococcus aureus…………………………………45Table des matières 4.2.5.2. Syndrome Staphylococcus de la peau ébouillantée………………………………….45 4.2.5.3. Les Staphylococcus cutanées, sous-cutanées et muqueuses…………………………45 4.2.5.4. Syndrome du choc toxique …………………………………..……………………...45 4.2.5.5. Intoxication staphylococcique………………………………………………..………46 4.2.6. La résistance de Staphylococcus aureus aux antibiotiques…………………..……….46 Deuxième partie : Etudes expérimentales Chapitre V : Matériels et méthodes 1. Matériel et méthode …………………..…………………………………………………..47 1.1. Déroulement de l'expérimentation………………………...……………………………..47 1.2. Echantillon du miel………………………………………………………………………47 1.3. Citron ……………………………………………………………………..……………..47 1.4. Les microorganismes utilisés ……………………………………………..…………….48 2. Matériels et appareillages utilisé …………………………………………………………48 3. Analyse physico-chimique du miel ……………………….………………………………49 3.1. La teneur en eau ……………………………………………………...………………….49 3.2. La teneur en cendre …………………………...…………………………………………50 3.3. Mesure de la densité relative……………………………………………………………..51 3.4. pH ……………………………………………………………………………………….51 3.5. Acidité libre………………………………………………………...……………………52 3.6. Conductivité électrique ……………………………….…………………………………52 4. Analyse physico-chimique du jus de citron ………………………………………………53 4.1. Mesure de l’indice de réfraction…………………………………………………………53 4.2. Mesure de la densité relative à 20 °C………………….………………………………..53 4.3. Détermination du pH…………………………….……………………………….………53 4.4. Détermination de l’acidité libre……………..………...……..…………………………..53 5. Teste de confirmation de souches …………….……………………….………………….54 5.1. Examen macroscopique……………………………..……………….…………………..54 5.2. Examen microscopique…………………………………………………………………..54 5.3. Coloration de Gram…………………………………..…………………………………..55 6. Test biochimique ……………….…………………………………………………………55 6.1. Catalase ………………...…………………………………………….………………….55 6.2. Oxydase ………………………………………………...………………………………..55 6.3. Fermentation du lactose………………………………………………………………….56Table des matières 6.4. Staphylocoagulase…………………………….………………………………………….56 7. Conservation des souches………………………………………………………………….56 8. Préparation de l’inoculum ………………………………….……………………………..56 9. Préparation de la suspension bactérienne……………………….…………………………57 10. Etude de l’activité antibactérienne …………………….………………………………57 10.1. Etude de l’activité antibactérienne du miel Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI)………………………………………………………………………………57 10.2. Etude de l’activité antibactérienne de citron Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI)……………………………………...…………………………….58 10.3. Préparation d’un milieu à base de miel, jus de citron et de gélose Muller Hinton……..58 11. In vivo…………………………………...………………………………………….……..60 11.1. Déroulement des essais………………………..………………………………………..60 11.2. Site de l’élevage…………………….…………………………………………………..60 11.3. Condition d’élevage ………………….………..…………………………….……………….61 11.3.1. les animaux ……………………………………………..…………………………….61 11.3.2. L’aliment ……………………………………………………………………………..62 11.3.3. Hygiène et prophylaxie……………………………………………………………….62 11.4. Contrôles effectués ………………..………………………………………………….62 11.5. méthode chirurgical ……………………………...…………………………………….62 11.6. Paramètres études …………………………………………..………………………….63 11.6.1. Le poids vif (g) ……………………………….………………………………………63 11.6.2. Le diamètre de la plaie……………….……………………………………………….63 11.6.3. Méthode de dénombrement des colonies ………………….…………………………64 11.6.4. Dénombrement des colonies ……………………………………….………………..64 11.7. Traitement des plaies …………………………………………………………………65 11.7.1. Traitement par miel ………………………………………………………………….65 11.7.2. Traitement par jus citron …………………………………………………………….65 11.7.3. Témoin ………………………………………………….……………………………66 Chapitre VI : Résultats et discussion 2. Résultats et discussion……………………………………………………………………..67 2.1. Analyses physico-chimiques…………………………………………...……………….67 2.1.1. Teneur en eau………………….………………………………………………………..67 2.1.2. La densité relative……………………………………………...……………………….68Table des matières 2.1.3. Le pH …………………………………………………………..………………………69 2.1.4. L’acidité libre…………………………………………………………………………..70 2.1.5. La conductibilité électrique (CE)………………………………………..……………..71 2.1.6. Taux de cendre …………………………………………………………………………72 2.2. Citron ………………………………………………………..…………………………..73 2.2.1. Teneur en eau…………………………………………………………………………...73 2.2.2. La densité relative………………………………………………………………………73 2.2.3. L’acidité libre…………………………………………………………………………74 2.2.4. Le pH…………………………………………………………………...………………74 2.3. Isolement et identification de Staphylococcus aureus et E.coli…………………..….…74 2.3.1. Test d’identification biochimique…………………………………...………………….74 2.4. L’activité antimicrobienne………………………………………..……………………77 2.4.1. Détermination de la concentration minimale inhibitrice du miel «CMI»……………....78 2.4.1.1. CM1 vis-à-vis E. coli……………………………………………………………….78 2.4.1.2.CMI vis-à-vis Staphylococcus aureus…………………………………………….…..79 2.4.2. Détermination de la concentration minimale inhibitrice synergique du mélange (miel + jus de citron « CMIS » vis-à-vis de Staphylococcus aureus et Escherichia coli………...…...82 2.5. In vivo …………………………………………………………………………….……...89 2.5.1. Les variations du poids ………………………………………..……………………….89 2.5.2. Diamètres de la plaie du lapin ……………………………………………..…………..91 2.5.3. Dénombrement des colonies …………………………………………………………...94 Conclusion………………………………………………………………………..…..………99 Annexes Références bibliographiques |
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